Grunnleggende om frysetørkingskulturer (lyofilisering)
Lyofilisering, også kjent som frysetørking, er en prosess som brukes for å bevare biologisk materiale ved å fjerne vannet fra prøven, som innebærer først å fryse prøven og deretter tørke den under vakuum ved svært lave temperaturer. Lyofiliserte prøver kan lagres mye lenger enn ubehandlede prøver.
Hvorfor lyofilisering brukes
Lyofilisering, eller frysetørking av bakteriekulturer , stabiliserer kulturer for langvarig lagring, samtidig som man minimerer skaden som kan være forårsaket av streng tørking av prøven.
Mange mikroorganismer overlever godt når de lyofiliseres og kan lett rehydreres og dyrkes i kulturmedier etter lengre tids lagring.
Lyofilisering brukes også i bioteknologi og biomedisinsk industri for å bevare vaksiner, blodprøver, rensede proteiner og annet biologisk materiale.
Denne korte laboratorieprosedyren kan brukes med enhver kommersielt tilgjengelig frysetørker for å bevare din kultursamling.
Lyofiliseringsprosessen
Lyofiliseringsprosessen er faktisk en anvendelse av et fysisk fenomen som kalles sublimering: overgangen av et stoff fra fast til gassformig tilstand uten først å passere gjennom væskefasen. Under lyofilisering fjernes vannet i den frosne prøven som vanndamp uten først å tine prøven.
Vanlige feil
En av de vanligste feilene når det gjelder lyofilisering, er ikke å vite smeltepunktet til prøven, noe som gjør det vanskelig å velge riktig lyofilisator.
Eksemplene dine kan smelte under prosessen. En annen vanlig feil er å tenke kaldere er bedre når frysetørking på en hylle-type frysetørker. Under primær tørking bør du sette hylletemperaturen like under prøvens eutektiske temperatur. Det bør være akkurat nok varme for å oppmuntre prøvens molekyler til å bevege seg - men hindre smelting.
En tredje feil bruker feil utstyr til prøvene dine. Fordi frysetørrere brukes i en gruppeinnstilling, bør du vite følgende før du kjøper en:
- Hvor mye fuktighet vil bli lyofilisert
- Hva prøven er (og eutektisk temperatur)
- Hvordan bruke frysetørkeren riktig
Hvis enheten ikke brukes riktig, kan det ødelegge alle prøvene. Som bringer oss til en annen vanlig feil: Ikke vedlikehold vakuumpumpen. Pumpen må være i god stand for lyofilisering til arbeid. Kjører pumpen med gasskoblingen åpen 30 minutter før og etter frysetørringsprosessen, vil øke pumpens levetid. Åpning av gassballasten fjerner forurensninger ut av pumpen for å hindre skade på interne komponenter. Du bør sjekke pumpen olje ofte for misfarging og partikler, og bytt olje etter behov. Regelmessige oljeskift holder pumpen trukket med optimal vakuum under frysetørreprosessen.
Til slutt kan det være en stor feil å ha feil frysetørkingstilbehør for lyofiliseringsprosessen. Trenger du en stoppprøve under vakuumet ditt? Deretter kreves et stoppkammer. Er du frysetørking i flasker? Deretter må du ha et tørkekammer med porter.
Ved å unngå de ovennevnte feilene, kan du bedre ta vare på frysetørkeren og pumpen, og få bedre prøver når frysetørking er ferdig.
referanser
Labconco News. "Topp 5 feil gjort i lyofiliseringsprosessen." http://www.labconco.com/news/top-5-lyophilization-mistakes